树脂柱-龙鼎世纪-树脂柱供应

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    2023-7-18

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交换

将试液加到交换柱上,用活塞控制一定的流速进行交换。

洗脱

当交换完毕之后,一般用蒸馏水洗去残存溶液,然后用适当的洗脱液进行洗脱。在洗脱过程中、上层被交换的离子先被洗脱下来,经过下层未被交换的树脂时,又可以再度被交换。

阳离子交换树脂常采用hcl溶液作为洗脱液;阴离子交换树脂常采用nacl或naoh溶液作为洗脱液。洗脱之后的树脂已得到再生,用蒸馏水洗涤干净即可再次使用。



层析柱是凝胶层析技术中的主体

层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,树脂柱生产厂家,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1,常用凝胶柱有50×25厘米,10×25厘米。滤板下的死体积应尽可能的小,如果支掌滤板下的死体积大,被分离组分之间重新混合的可能性就大,其结果是影响洗脱峰形,出现拖尾出象,降低分辩力。在分离时,树脂柱厂家,死体积不能超过总床体积的1/1000。



关于层析柱装柱、使用及相关注意事项

(1)、装柱前要仔细看填料的使用说明书,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同;这一点非常重要:装柱包括以后使用中不允许柱内进入气泡(bubble free),柱头事先也要排除气泡。

(2)、填料要加水搅拌成均匀悬液,悬液浓度依填料而不同,一般70-85%,迅速倒入空柱内,或吸或压,流速和具体步骤看说明书。

(3)、所有柱子尽量做到填料均匀,尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后,可用柱效测定的方法检查装填效果。一个装填合格的柱子的理论塔板高度应是填料平均粒径的2-4 倍,树脂柱供应,在此范围内越小越好。

(4)、选择合适的泵,**是流速满足要求,脉冲尽量小。柱塞泵。

(5)、准备上柱的液体应进行过滤,至少是0.45micrometre。

(6)、关于纯化,**要考虑的是你的目标:纯度、数量、速度、收率等等,再根据样品的具体情况,尤其是目标蛋白的性质,树脂柱,确定纯化策略。通常三步曲:capture、purification、polishing。*步先从大量或复杂样品---目标蛋白%26ldquo;抓出%26rdquo;,与主要杂质分离;再用高选择性的层析去除绝大部分杂质;后精细纯化,提供纯度至设定目标。到实际工作中,不要死靠三步,也许一步也许四步或更多,具体情况具体分析。所谓%26ldquo;三步%26rdquo;只是一种思路而已。

(7)、至于测序,我想大概不到1mg 应该足够了。



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