




层析柱进气泡怎么办?
空气进入,如缓冲液走空,连接进入系统过程中
用纯水反向冲洗,如果有柱位阀可直接切换流向,没有的话可将柱子反接
对于大多数层析柱来说可用---冲洗,以提高排气效率
缓冲液中有气泡
上柱前将缓冲液脱气
在缓冲液入口使用空气感应器
温度影响,如在冷室操作后马上在室温操作,或低温缓冲液直接在室温使用
缓冲液在使用前达到热平衡
作为一种新型的吸附材料,大孔吸附树脂在工业废水处理过程中有其的优势,主要表现为:
对废水中有机物浓度从几mg/ l到上万mg/ l均可进行处理,广谱范围吸收,通用性好;
针对废水中特定的污染物质,可资源化回收;
具有较高的吸附容量,吸附基本不受无机盐类及其他离子、小分子存在的影响;
具有较高的耐氧化、耐酸碱、耐的性能,树脂柱价格,机械强度高,循环使用---;
脱附常用酸碱或,脱附工艺简单、操作方便,且运行费用相对低廉。
关于层析柱装柱、使用及相关注意事项
(1)、装柱前要仔细看填料的使用说明书,每种填料都有自己的特性,以及特殊的装柱方法,树脂柱,针对不同的空柱,也要注意方法可能不同;这一点非常重要:装柱包括以后使用中不允许柱内进入气泡(bubble free),柱头事先也要排除气泡。
(2)、填料要加水搅拌成均匀悬液,悬液浓度依填料而不同,一般70-85%,迅速倒入空柱内,或吸或压,流速和具体步骤看说明书。
(3)、所有柱子尽量做到填料均匀,尤其是用于凝胶层析的柱子。装柱完成后,可用柱效测定的方法检查装填效果。一个装填合格的柱子的理论塔板高度应是填料平均粒径的2-4 倍,在此范围内越小越好。
(4)、选择合适的泵,**是流速满足要求,脉冲尽量小。柱塞泵。
(5)、准备上柱的液体应进行过滤,树脂柱供应,至少是0.45micrometre。
(6)、关于纯化,**要考虑的是你的目标:纯度、数量、速度、收率等等,再根据样品的具体情况,尤其是目标蛋白的性质,确定纯化策略。通常三步曲:capture、purification、polishing。*步先从大量或复杂样品---目标蛋白%26ldquo;抓出%26rdquo;,树脂柱多少钱,与主要杂质分离;再用高选择性的层析去除绝大部分杂质;后精细纯化,提供纯度至设定目标。到实际工作中,不要死靠三步,也许一步也许四步或更多,具体情况具体分析。所谓%26ldquo;三步%26rdquo;只是一种思路而已。
(7)、至于测序,我想大概不到1mg 应该足够了。
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