平衡柱子
即用洗脱剂中极性小的溶剂(例如、、等)用计量泵(或氮气)打入(压入)层析柱上端。此溶剂因极性小于硅胶,不会把吸附在硅胶上端面的物料中有用物质洗脱下来,而只能将物料中的极性很小的油脂等杂质洗下。另外,此过程还可以将柱中硅胶中的大量空气往下赶出柱外。这个过程俗称“平衡”柱子或“平衡”吸附剂。可使硅胶被溶剂浸润,且排出空气,有利于续后的洗脱分离过程。
当平衡用的溶剂从柱---出后,可以停止此过程,改用洗脱剂洗脱分离过程;平衡过程也可以再理行一段时间,将柱子中的空气多排出一些,但溶剂耗量也会增加。
影响大孔吸附树脂吸附性能的主要因素 大孔吸附树脂的分离效果受溶液的ph值、吸附质的极性、分子大小、树脂柱的清洗和洗脱液的种类等因素制约,同时也与外界的温度和压强有关。影响其吸附性能的主要因素如下:(1)大孔吸附树脂的比表面积越大,一般吸附性能越好,吸附量越多。(2)大孔吸附树脂的孔径越大,吸附质分子在孔内的扩散速度也越大,有利于达到吸附平衡。经验表明,当吸附剂孔径与吸附质分子的直径比为6∶ 1左右时,大孔树脂柱多少钱,吸附性能佳。(3)随着孔容的增加,大孔吸附树脂的吸附量增加。(4)大孔吸附树脂孔径的大小,直接影响不同大小分子的自由进入,从而使树脂吸附具有选择性。只有当孔径对于被吸附组分足够大时,比表面积才能充分发挥作用,且大孔吸附树脂的孔径分布越窄,吸附性能越好。(5)极性树脂较易吸附极性物质,非极性树脂较易吸附非极性物质。(6)若大孔吸附树脂上的功能基团与吸附质分子之间可以形成氢键或电子转移络合物,则有较强的吸附作用。(7)大孔吸附树脂的吸附一般都是放热过程,温度升高,吸附量将减少。(8)压强是影响大孔吸附树脂吸附的因素之一,大孔树脂柱供应,压强越大,吸附量越多,大孔树脂柱,而吸附速率也随着压强的增大而增大。(9)当溶液中存在两种以上溶质时,往往会引起一种溶质易吸附而另一种溶质的吸附量降低,一般来讲,对混合溶质的吸附较纯溶质的吸附效果差。(
层析柱的操作方法1.层析柱再生、平衡有效成分经tlc检识全部流出后,用纯5000ml再生,大孔树脂柱生产厂家,一(5:95)平衡后,可再次上样,反复使用(使用次数随原料不同而异,一般可连续使用2—6个月以上)。2.重结晶冬凌草甲素结晶析出完全后,减压过滤,然后用少量洗涤(洗涤液保留,作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置,结晶再次析出,待结晶完全后,抽滤,用少量洗涤,将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中,35度真空干燥至恒重。密封于瓶中,置干燥器中保存。3.薄层层析分析取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶g薄层板上,以一(8:2)为展开剂进行展开,5% 香草醛---液显色,于105。c烘至斑点清晰。表明在该展开系统下,冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的rf值,并呈现出同样的蓝绿点,在制备的冬凌草甲素样品中,没有杂质斑痕。
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