层析柱供应-层析柱-天津龙鼎世纪轻工设备

层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。在分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。

层析柱装柱步骤流程

1.计算每厘米柱床高度填料的数量；

2.选择合适的配件和末端筛网，选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料泄露；

3.选择装柱流速

首先：拍排泡

第二：调水平

第三：匀浆

第四：装柱

第五： 绘制压力/流速曲线，装柱流速为大流速的70%-100%。

柱效检测

柱效主要取决于装柱。如果是离子交换或亲和层析填料，则不能使用有色物质，层析柱供应，如蓝色葡聚糖。表征柱效的两个指标是理论板当量高度（hetp）和对称因子as，层析柱，使用nacl或通过测定uv吸收或电导率进行计算。

使用nacl溶液进行测定，优点样品是易得、安全，缺点是可能与填料发生反应，---是离子交换树脂，层析柱生产厂家，因此影响测定结果。使用进行测定，其不与层析填料发生反应，并且可通过检测280 nm处的紫外吸收进行测定，并且，测定缓冲液的浓度可提高至10倍。