




层析柱进气泡怎么办?
空气进入,如缓冲液走空,连接进入系统过程中
用纯水反向冲洗,如果有柱位阀可直接切换流向,没有的话可将柱子反接
对于大多数层析柱来说可用---冲洗,以提高排气效率
缓冲液中有气泡
上柱前将缓冲液脱气
在缓冲液入口使用空气感应器
温度影响,如在冷室操作后马上在室温操作,或低温缓冲液直接在室温使用
缓冲液在使用前达到热平衡
实验室常用是什么规格的层析柱
层析柱是凝胶层析技术中的主体,我们研究所用的就是同兴玻璃仪器,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,大孔树脂柱多少钱,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,大孔树脂柱厂家,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。
玻璃层析柱,开口大,加料快,不需要其他仪器的配合,上方可以做成标准口与其他的标口玻璃仪器相接,但有不容易测量,筛网下方容易残留很多液体,层析速度较慢,不准确的特点,一般用于对精度要求没有那么高的实验,
加压层析柱,两端一般使用4f材料,耐腐蚀,酸碱性的耐度也可以,中段有玻璃材料的,大孔树脂柱,也有有机玻璃材料的,需要与---泵相结合,加快层析速度,用泵将料打进,如果没有泵则使用比较麻烦。
一文了解亲和层析柱装柱注意事项
1.洗脱
亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种:特---洗脱和非特---洗脱。
(1)特---洗脱
特---洗脱是指利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。
特---洗脱也可以分为两种:一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱,另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时,大孔树脂柱供应,选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液,这种物质与待分离物质竞争对配体的结合,在适当的条件下,如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大,配体就会基本被这种物质占据,原来与配体结合的待分离物质被取代而脱离配体,从而被洗脱下来。
例如用凝集素作为配体分离糖蛋白时,可以用适当的单糖洗脱,单糖与糖蛋白竞争对凝集素的结合,可以将糖蛋白从凝集素上置换下来。
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